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冷冻血液中红细胞力学特性研究(5)

时间:2025-08-07 22:08来源:100309
(2)二氧化硅微球的清洗:取出二氧化硅小球摇匀后,用量程为1000l的移液枪吸取400l的单分散二氧化硅至一4ml的试管,再向试管中加入去离子水使溶液总

(2)二氧化硅微球的清洗:取出二氧化硅小球摇匀后,用量程为1000μl的移液枪吸取400μl的单分散二氧化硅至一4ml的试管,再向试管中加入去离子水使溶液总量达到4ml。将试管放入超声频率为40KHZ,温度为40℃的超声机中进行15分钟的清洗。二氧化硅微球溶液的离心在清洗完成之后,离心过程中设置离心转速7500rpm,离心时间为5分钟。离心完成后,再在去除了上层清液的试管中加入去离子水,使试管中的溶液达到4ml,用磷酸盐溶液对进行过三次清洗的溶液定容至2ml,。

(3)配制牛血清蛋白溶液:首先对电子天平调零。天平调零后称取0.179g的牛血清。用3570μl的去离子水溶解所称得的牛血清,得到所需要的牛血清蛋白溶液。

(3)制作观察所要的溶液:拿出已经清洗好的红细胞,使用两次量程100μl的移液枪,共取150μl至一个容量为4ml的试管之中。再用量程为100μl的移液枪吸取40μl配制完成的牛血清蛋白溶液加入试管,之后换用量程为1000μl的移液枪吸取750μl的磷酸盐溶液加入试管,用混合仪摇匀后,放入冰箱待用。

(4)制作样品池:用清水冲洗载玻片和盖玻片后,用擦镜纸将其擦干。用指甲油,将与盖玻片同宽的两根细塑料条粘在载玻片上,两条塑料条的间距应略小于盖玻片的宽度,以使盖玻片放置于载玻片上是能在两者直接存在一定的间隙。在此之前,应先用试管在盖玻片上第一滴盖玻片上第一滴牛血清蛋白溶液,将溶液涂匀,放置在一边自然风干。在盖玻片上的牛血清蛋白溶液风干之后,再在已经粘在载玻片上的塑料条上涂上指甲油,将盖玻片涂有牛血清蛋白的一面朝下,粘贴在载玻片上。等到玻片被完全粘在一起干后,用吸管取少量的血液溶液,利用液体扩散时的边缘效应,使溶液被吸入玻片的缝隙之间,当试剂充满缝隙之后,再用指甲油将缝隙边缘密封。用上述方法制作六个样品池,贴上标签后分别放入45℃、35℃、10℃、2℃的恒温箱中以及室温20℃下保存待用,最后一个用于存放二氧化硅小球溶液。图2-3是处理好的样品池.

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