事实证明，无论是在生理方面还是病理方面红细胞都能起到很深的影响。血液与全身的器官都有相关，所以血液能反应人体系统和组织的健康状况。如果血液的流变特性出现异常，那么人体的健康状况一定会受到影响。温度变化影响红细胞结构的改变[13]。因此，我们在研究血液的保存与输血过程时，应当控制环境因素对细胞形变能力的影响，使血液能够物尽其用。而输血过程中，由于使用的是低温保存的血液，而输血时的室温也会随着季节气候变化，所以血液温度成为输血过程中一个重要的影响因素。

1.3.3测量红细胞形变程度的方法

红细胞的相对伸长量是体现红细胞形变能力及弹性的重要参量。对红细胞测量方法的研究，在国际上主要分为宏观法和微观法。从宏观方面考虑有有激光衍射法、光度法、粘度法、电测量法以及微孔滤筛法等，从微观方面考虑有微吸管法、光镊牵拉法以及底部附着法等[14]。本实验中用到光镊牵拉法对红细胞相对伸长量进行测量。实验中细胞端固定与样品室底部，由光镊牵拉细胞另一端测量细胞形态变化量。利用了光镊能够捕获和操纵纳米级微粒，而不对其产生机械损伤、干扰其周围环境及他的正常活动的特性，在不破坏红细胞结构的情况下对其相对伸长量进行测量。其他的测量方法很难运用大细胞群体上，测量细胞在不受干扰情况下的形变，得出单个红细胞的形变以及作用力的关系也很难做到。综合各种测量方法的特点和优缺点不难得出光镊牵拉法是最适宜测量血液细胞相对伸长量的方法。

2 实验材料和测量形变的方法 

    本章主要介绍这次实验中试剂的配制和配制溶液过程所需要的仪器，光镊系统的构成、操作方法以及测量红细胞相对伸长量的方法。

2.1材料和仪器

用于试验的样品是由江苏省徐州市铜山中医院提供的正常人体新鲜血液。单分散二氧化硅微球、牛血清蛋白(BSA)、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、去离子水、蒸馏水是在实验中主要需要用到的材料。实验中用到的基本实验用品包括量程分别为100和1000μm的移液枪两只、显微镜载玻片、盖玻片、擦镜纸、2ml和4ml的试管等

Tweez250si高速多光阱纳米光镊系统光，SI漩涡混合仪，超声波清洗机，小型离心机为实验主要使用的仪器。其中光镊系统的结构组成包括：作为激光光源，波长为1064nm，最大输出功率为5W的Nd：YAG激光器、显微物镜、载物台、光镊移动控制杆、位移检测传感装置,摄像头和计算机。光镊汇聚与观测点上，并由物镜显示出来，对激光光束使用分束器，并对激光进行反射，是光镊系统工作的原理。其中，物镜的倍数放大为100。我们可以通过软件，使用鼠标调整光镊的位置，同时，通过操作柄可以移动所要观测的样品池。由此，能够实现在样品池中找到合适的细胞，应用光镊对其进行操作。图2-1为实验所用光镊系统实物图，图2-2为光镊的光路图。

图2-1光镊的实物图

图2-2光镊的光路图

2.2红细胞样品池的制备

（1）红细胞清洗：从医院得到的是每试管2ml的血液，用量程为100μl移液枪从试管中40μl血液到一个新的试管中，用吸管吸取磷酸盐溶液加入盛有40μl血液的试管中，使稀释过的血液达到2ml。用混合仪摇匀。将血液放入离心机中离心，设置离心机转速为1500rpm，离心时间为5分钟。离心完成后，试管中溶液出现分层，下部为血液，上面为上层清液，习惯去除试管中的上层清液后再次加入磷酸盐溶液至2ml，再放入离心机中离心，一共进行三次离心。离心完成后，最后进行定容。  冷冻血液中红细胞力学特性研究(4):http://www.chuibin.com/wuli/lunwen_205902.html