2材料与方法 5

 2.1实验材料 5

  2.1.1实验原料 5

  2.1.2实验试剂 5

 2.2实验仪器与设备 5

  2.1.3实验仪器 5

 2.3实验方法与步骤 6

  2.3.1猴头菇β-葡聚糖提取工艺优化 6

  2.3.2多糖含量分析 9

3结果与分析 12

 3.1单因素实验结果 12

  3.1.1初始水温对多糖含量的影响 15

  3.1.2破碎时长对多糖含量的影响 18

  3.1.3料液比对多糖含量的影响 18

 3.2猴头菇β-葡聚糖响应曲面法优化试验 20

  3.2.1试验矩阵及响应结果 20

  3.2.2Design-Expert软件得出的结果 21

 3.3猴头菇β-葡聚糖（葡聚糖GLP20）的HPSEC 24

 3.4猴头菇β-葡聚糖结构分析实验 26

3.4.1红外光谱分析结果 26

 3.5猴头菇β-葡聚糖生物活性分析 27

  3.5.1DPPH自由基清除活性 27

4结论与展望 28

 4.1结论 28

 4.2展望 28

致谢 29

参考文献 30

1绪论

1.1猴头菇（H. erinaceus）β-葡聚糖研究进展

1.1.1猴头菇（H. erinaceus）β-葡聚糖提取工艺的研究进展

在过去几年中，关于分离和提纯来自猴头菇（H. erinaceus）的潜在生物活性多糖的方法已经引起了关注。通常采用的多糖提取方法是将粉状子实体在热水中搅拌数小时，因此非常耗时。在水中微波辐射对于从子实体中提取多糖的时间持续性具有优势。一项研究表明，微波辐射在140℃水中进行5分钟的可提取性几乎等同于在100℃下进行6小时的常规外部加热。在水中微波辐射得到的主要多糖是富含（1→3）键的β-d-葡聚糖，而通过常规外部加热的传统热水提取获得的β-d-葡聚糖是富含（1 →6）键，这被证实与除去的杂多糖如作为解聚低分子量组分的岩藻糖聚糖有关[9]。

考虑到有机毒性溶剂的使用不利于食品安全，因此有机溶剂的有限性和原料的整体分离是有必要的。包括微波水重力，超临界CO2萃取在内的一系列阶段。用于获得猴头菇（H. erinaceus）的可溶性部分，剩余的固相用酶辅助萃取或用水进行非等温自动水解。拟议的绿色过程导致猴头菇（H. erinaceus）的超过40％溶解。由于反应条件相对温和，酶辅助萃取具有环保，高效和容易操作的优点。酶可以有效地降解细胞壁，以促进作为真菌细胞壁中的结构组分存在的生物活性多糖的释放。响应曲面法和基于单因素和正交试验的Box-Behnken设计应用于猴头菇（H. erinaceus）子实体β-葡聚糖的酶辅助提取工艺优化，这导致β-葡聚糖产量最高，为13.46％ 。

分离和纯化猴头菇（H. erinaceus）β-葡聚糖的一般程序可概括如下：在回流下用乙醇预先提取猴头菇（H. erinaceus）的总子实体或菌丝以去除脂质。 将剩余的残余物干燥并用热水提取，过滤并浓缩后收集多糖溶液。 通过醇沉淀获得粗多糖，然后将粗多糖溶于水中并通过离心除去不溶残余物。将上清液应用于包括阴离子交换层析和凝胶渗透层析的图1.1所述的不同柱层析以获得纯化的多糖。                  猴头菇葡聚糖的提取优化和活性评价(2):http://www.chuibin.com/yixue/lunwen_205840.html