72℃,7min 35

反应完成后,取3lPCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测(琼脂糖粉末0.2 g与1×TBE 缓冲液20 ml混合加热溶解,制胶后上样,电泳时电压为90V,时间大约30到45分钟),来确认PCR扩增片段。用Marker做对照,若仅在1500bp左右出现了一条条带,则证明DNA片段扩增成功,可以将剩下的样品送去公司测序。

测序结果获得以后,用NCBI Blast程序将拼接后的序列文件与NCBI数据库中的数据进行比对,得到与待菌种序列相似性最大的菌种信息,即为鉴定结果。

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