1．1．1供试菌株 6

1．1．2供试材料 6

1．1．3  培养基 6

1．1．4主要试剂与溶液 7

1．1．5主要仪器设备 8

1．2  目的菌株筛选及鉴定 8

1．2．1  目的菌株筛选 8

1.2.1.1水稻根部及茎叶内生菌的分离 8

1．2．2 菌种平板活化 8

1．2．3 产精氨酸脱羧酶细菌筛选 8

1．2．4 菌株种属鉴定 8

1.2.4.1 细菌基因组DNA提取 8

1.2.4.2 菌株16S rRNA基因的PCR扩增 9

1.2.4.3 TA克隆 9

1.2.4.4序列分析 9

1.2.5菌株的菌落形态特征和革兰氏染色 9

1.2.5.1菌株的菌落形态特征和革兰氏染色 9

1.2.5.2 菌株革兰氏染色 9

1．3筛选菌株生物学特性的测定 9

1.3.1菌株重金属抗性的测定 9

1.3.2菌株抗生素抗性的测定 10

1.3.3菌株产铁载体能力的测定 10

1.3.4菌株产吲哚乙酸能力的测定 10

1.3.5菌株产硫化氢定性测定 10

1.4 供试菌株在动态条件下对砷、铅吸附特征 10

2  结果与分析 11

2．1菌株种属鉴定 11

2.1.1水培筛箘实验 11

2.1.2菌株种属鉴定 11

2.1.3供试菌株的菌落和菌落形态特征与革兰氏染色情况 11

2．2待测菌株生物学特性的测定 12

2.2.1待测菌株重金属抗性 12

2.2.2待测菌株抗生素抗性 13

2.2.3铁载体、IAA、产硫化氢能力和精氨酸脱羧酶能力 14

2.3 待测菌株在动态条件下对砷、铅吸附特征 15

3  讨论 15

3.1本实验创新之处 15

3.2本实验不足之处 15

致谢： 15

参考文献： 16

砷、铅耐受性植物内生菌株的筛选与其生物学特征的测定

引言

铅是一种危害极大的重金属元素，在土壤中广泛存在，在当代社会中广泛的用于涂料、电池和杀虫剂等工业产品中，造成了很大污染[1]，对人的健康与生物体有着较为严重的影响。铅能对植物的外形，成长和光合作用等有着很大的影响，在水稻的生长中，铅可以通过抑制水稻胚乳中50%以上的蛋白酶及淀粉酶活力，从而使水稻的种子萌发受到抑制[2]。同样，铅在人体内过量时就会对人体的骨骼动脉，肝脏，肾和脑中枢神经系统造成损伤[3]，导致婴幼儿出现智力低下、贫血等症状。